- تاریخ انتشار : ۱۳۹۶
- ناشر : ششمین کنفرانس بین المللی پژوهش در مهندسی،علوم و تکنولوژِی
- زبان مقاله : همه
- تعداد صفحات : 16
- حجم فایل : 952.395 کیلوبایت
- نوع مقاله : مجموعه مقالات کنفرانس
- مجموعه : کشاورزی
چکیده مقاله
استفاده از ژن اولئوزین گیاهی یک روش مناسب برای تولید و افزایش تجمع پروتئین نوترکیب در مقیاس زیاد و همچنین استخراج راحتتر و ارزانتر میباشد. اتصال اولئوزین به ژن مورد نظر، موجب هدفگیری پروتئین نوترکیب به اجسام روغنی بذر میشود. در سالهای اخیر، به منظور افزایش میزان کارایی اولئوزین در تولید پروتئین نوترکیب، چند ژن اولئوزین به صورت متوالی به هم متصل و پلیاولئوزین ایجاد شده است. اتصال پلیاولئوزین به ژن هدف به تنهایی، باعث افزایش تولید و تجمع پروتئین نوترکیب در سطوح اقتصادی، در بذر میگردد. از اینرو برای افزایش میزان تجمع پروتئین پروانسولین در بذر گیاه کلزا، یک سازهی تلفیقی پلیاولئوزین-پروانسولین طراحی و ساخته شد. در طراحی این توالی به ترتیب از سمت /5 توالی، یک توالی کزاک، یک برچسب هیستیدین، سه ژن اولئوزین، یک جایگاه پروتئولیتیکی برای پروتئاز، ژن پروانسولین و یک کدون پایان تترانوکلئوتید قرار گرفت. تلفیق ژنی پس از سنتز در ناقل pUC57 قرار داده شد. تلفیق ژنی، پس از هضم آنزیمی به وسیلهی آنزیمهای BamHI و SacI از pUC57 جداسازی و در ناقل دوتایی pBI121 همسانهسازی گردید. پس از تائید درج تلفیق ژنی در ناقل pBI121 با استفاده از روشهای PCR و توالییابی، ناقل نوترکیب به سویهی LBA4404 اگروباکتریوم انتقال داده شد. این باکتری برای تراریختی ریزنمونههای کوتیلدون و هیپوکوتیل کلزا مورد استفاد قرار گرفت. نوساقههای باززایی شده در محیط انتخابی حاوی کانامایسین گزینش شدند. آنالیز گیاهان تراریخته در سطح DNA با استفاده از روش PCR انجام و یک قطعهی 120 جفت بازی (مطابق با بخشی از ژن پروانسولین) تکثیر شد. همچنین تکثیر این قطعهی 120جفتبازی با روش RT-PCR، بیانگر بیان ژن هدف در گیاهان تراریخته بود.
نحوه استناد به مقاله
در صورتی که می خواهید به این مقاله در اثر پژوهشی خود ارجاع دهید، می توانید از متن زیر در بخش منابع و مراجع بهره بگیرید :
نجمه آیت فرد ؛اسماعیل قاسمی گوجانی؛علیرضا شافعی¬نیا؛پیام پورمحمدی ؛ ۱۳۹۵، طراحی تلفیق ژنی پلی¬اولئوزین-پروانسولین و انتقال آن به گیاه کلزا (Brassica napus L.)، ششمین کنفرانس بین المللی پژوهش در مهندسی،علوم و تکنولوژِی، https://scholar.conference.ac:443/index.php/download/file/12860-The-design-of-the-synthesis-of-polyvalosin-provenosolin-gene-and-its-transfer-to-rapeseed-(Brassica-napus-L.)
در داخل متن نیز هر جا به عبارت و یا دستاوردی از این مقاله اشاره شود پس از ذکر مطلب، در داخل پرانتز، مشخصات زیر نوشته شود.
(نجمه آیت فرد ؛اسماعیل قاسمی گوجانی؛علیرضا شافعی¬نیا؛پیام پورمحمدی ؛ ۱۳۹۵)
