اثر عصاره گیاهی هلیله زرد بر تشکیل فیبریل آمیلوئید آلفا سینوکلئین در شرایط آزمایشگاهی

چکیده مقاله

چکیده :

از عوامل اصلی در ایجاد بیماری های نورودژنراتیو نظیر پارکینسون رسوب پروتئین‌های نامحلول درسلول‌های عصبی هست. آلفا سینوکلئین (α-syn) از مهمترین پروتئین هایی می­باشد که در پارکینسون نقش دارد. این پروتئین در تنظیم سیناپسی               و آزادسازی دوپامین نقش دارد و رسوب آن در سلول های عصبی باعث کاهش ترشح دوپامین و درنتیجه تشدید علایم پارکینسون می­شود. استفاده از عصاره های گیاهی حاوی ترکیبات فلاونوئیدی که اثرات آنتی اکسیدانی دارند از راهکار­های درمانی برای مهار فیبریل آمیلوئیدی یا رسوب پروتئینی می­باشد. با توجه به این موضوع در این تحقیق از عصاره گیاهی هلیله زرد در غلظت­های مختلف استفاده شد تا اثر مهارکنندگی آنها بر تجمع پروتئین آلفاسینوکلئین در شرایط آزمایشگاهی بررسی شود.از باکتریBL21  که حاوی ژن آلفا سینوکلئین است استفاده شد و بیان پروتئین آلفا سینوکلئین پس از القا توسط IPTG(mM1) در دمای37 درجه سانتی‌گراد به فرم محلول صورت گرفت و توسط SDS-PAGE حضور پروتئین مشخص شد. پروتئین توسط کروماتوگرافی نیکل سفارز تخلیص، سپس دیالیز و در نهایت به کمک PEGتغلیظ شد. تشکیل فیبریل‌­های آمیلوئیدی تحت شرایط انکوباسیون 37 درجه سانتی­گراد ، غلظت پروتئینmg/mL 2.2 و درpH برابر با 7 انجام شد و توسط فلورسانس تیوفلاوین تی و میکروسکوپ الکترونی(TEM) به اثبات رسید. سپس تاثیرعصاره گیاه در غلظت های mg/mL 0.15 ،mg/mL 0.3 و mg/mL 0.5 بر فرآیند تجمع آلفاسینوکلئین توسط فلورسانس تیوفلاوین تی بررسی گردید. نتایج بیانگر این است که در غلظتmg/mL  15/0 از عصاره فیبریلاسیون  مهار نمی شود  و غلظت mg/mL 0.5 و mg/mL 0.3 از عصاره هلیله زرد ، فیبریلاسیون مهار می­شود، ولی در غلظتmg/mL 0.5 از عصاره مهار فیبریلاسیون تغییر معنا داری را نشان نمی دهد.

دریافت لینک دانلود مقاله