تعيين گونه هاي انگل کریپتوسپوریدیوم انسانی در شهر مهاباد با استفاده از آناليز PCR-RFLP قطعه 845 bp ژن s rRNA

چکیده مقاله

کريپتوسپوريديوم يك تك ياخته مشترک بين انسان و دام است که به عنوان عامل مهم اسهال آندميك
و اپيدميك شناخته شده که اغلب کودکان و بيماران دچار نقص سيستم ايمني بويژه مصرف
کننده داروهای سرکوبگر ايمني سلولار و هومورال را تهديد ميکند. مطالعه حاضر با هدف بررسي
ميزان شيوع کريپتوسپوريديوم و ارتباط آن با برخي از متغيرها و تمايز ايزوله های انساني بر
مبنای قطعه 845bp ژن 18s rRNA ، جهت تعيين گونه های شايع اين انگل در مهاباد طراحي و اجرا
399 نمونه مدفوع از آزمايشگاههای سطح - - ، شد. در اين مطالعه توصيفي مقطعي، طي تير 39 خرداد 39
شهر مهاباد مورد بررسي قرار گرفت. پس ازتغليظ با روش فرمالين اتيل استات، در ادامه گسترشهای -
تهيه شده بروش کاينيون اسيد فاست رنگ آميزی شد، جهت بررسي مولکولي نمونه های مثبت
بروشهای گراديانت منقطع ساکارز و گراديانت پرکول مورد تخليص و جداسازی قرار گرفتند در مرحله
بعد DNA ژنومي استخراج و قطعه ژن 18s rRNA جدايه ها با روش Nested-PCR تکثير گرديد،
سپس محصول PCR با آنزيم محدود کننده Vsp1 برش داده و تعيين ترداف شد. پردازش اطلاعات با
بهره گيری از نرم افزار Excell,v.2013 و v.19 , SPSS انجام پذيرفت. برای تعيين ارتباط بين متغيرها از
آزمون )کای اسکوئر χ2 ( با اطمينان 39 ٪ استفاده شد.از نمونه های رنگ آميزی شده بروش کاينيون
0٪( مثبت تشخيص داده شد، آناليز داده ها نشان داد که اختلاف معني / اسيد فاست 09 نمونه ) 00
داری مابين ميزان شيوع انگل در گروههای سني مختلف، محل سکونت مختلف و ابتلا به نقص سيستم
ايمني با افراد عادی وجود داشت) P<0.05 (. همه نمونه های مثبت با روش Nested-PCR تأييد شد.
نتايج PCR-RFLP روی ژن 18s rRNA نشان داد که از ميان 09 ايزوله مثبت انساني ، 3 ايزوله دارای
ژنوتايپ کريپتوسپوريديوم پاروم و 0 ايزوله ديگر ژنوتايپ هومنيس بود که حاکي از غالب بودن
کريپتوسپوريديوم پاروم حيواني در آلودگيهای انساني بود در حاليکه گونه هومنيس نيز مشاهده شد.

دریافت لینک دانلود مقاله